【摘要】目的：研究复方天麻颗粒的含量测定方法。方法：采用高压液相色谱法测定五味子醇甲的含量。结果：五味子醇甲在0.045～0.72 μg范围内线性关系良好（r＝0.9999），平均回收率为100.5％， RSD=2.2%。结论：建立的含量测定方法简便、准确、重复性好，可用于复方天麻颗粒的质量控制。
【关键词】复方天麻颗粒；五味子醇甲；高效液相色谱法；含量测定
文章编号：1009-5519（2008）12-1775-02 中图分类号：R28 文献标识码：A
复方天麻颗粒[1]由天麻、五味子、麦冬三味药组成，用于失眠健忘，神经衰弱，以及高血压引起的头昏头痛。其中五味子是治疗失眠健忘，神经衰弱的重要药味，五味子醇甲为五味子的特征成分，故选定五味子醇甲作为指标成分，参照中国药典2000年版一部[2]进行含量测定研究，操作简便、快速，结果准确。
1 实验部分
1.1 仪器与试药：SPD-10A高效液相色谱仪，包括VP紫外-可见检测器（日本岛津）、CLAA-VP色谱工作站。五味子醇甲对照品（中国药品生物制品检定所）；甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；复方天麻颗粒（绵阳一康制药有限公司，批号：040601、040602、040603）。
1.2 方法与结果
1.2.1 色谱条件与系统适用性试验：色谱柱为Shim-pack C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为甲醇－水(65∶35)，检测波长250 nm。理论板数按五味子醇甲峰计算，应不低于2×103。
1.2.2 溶液的制备：精密称取五味子醇甲对照品18.04 mg，加水适量使溶解并稀释成100 ml，得浓度为0.1804 mg・ml－1的对照品贮备溶液；再稀释20倍得浓度为9.02 μg・ml－1的对照品溶液。取内容物1 g，研细，精密称定，置50 ml量瓶中，加甲醇40 ml，超声处理（功率250 W，频率50 KHz)30分钟，取出，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，即得供试品溶液。同时，按供试品溶液的制备方法制得缺五味子的阴性样品溶液。
1.2.3 方法专属性：在1.2.1项条件下，分别量取10 μl对照品溶液、供试品溶液和阴性样品溶液进样。由图1可见，其他成分对五味子醇甲的测定无干扰。见图1。
1.2.4 线性关系的考察：精密量取对照品溶液（0.0902 μg/ml）5 μl、10 μl、20 μl、60 μl、80 μl注入色谱仪，记录峰面积。以峰面积A对进样量C进行回归，得回归方程：A=1.163×106C-1.645×105（r=1.0000）。五味子醇甲在0.045～0.72 μg之间，进样量与峰面积线性关系良好。
1.2.5 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10 μl，重复进样5次，峰面积的RSD=0.57%，表明仪器进样精密度良好。
1.2.6 重复性试验：取同一批号样品5份，照1.2.2项下方法制备供试品溶液，然后分别测定含量， RSD=2.0%，表明该方法的精密度良好。
1.2.7 稳定性试验：供试品溶液在室温下放置1、3、6、12、24小时，分别测定，以五味子醇甲色谱峰面积积分值计算，RSD=0.52%，表明供试品溶液在24小时内基本稳定。
1.2.8 加样回收试验：精密称取供试品（批号040601，含量为0.512 mg/g）适量，精密加入一定量的对照品贮备溶液（0.1804 mg/ml），按照1.2.2项下方法测定，计算回收率，平均回收率为100.5%，RSD=2.23%。
1.2.9 样品的测定：取本品，按1.2.2项下方法制备成供试品溶液。精密量取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，3批样品含量分别为2.51 mg/袋、2.63 mg/袋、2.46 mg/袋。
2 讨论
2.1 实验比较了Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），DiscoveryC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），SHIMADZU VP-ODS柱（250×4.6 mm，5 μm）的色谱柱。结果表明不同品牌的色谱柱分离效果均较好，本品含量测定对色谱柱的选择性不强。
2.2 供试品溶液的制备采用甲醇超声提取法，实验比较了超声提取20、30、45、60分钟后五味子醇甲的量，结果表明五味子醇甲提取以甲醇超声处理30分钟为宜。
2.3 采用高效液相色谱法测定五味子醇甲的含量，方法简便、可靠，可作为质量控制方法。
参考文献：
[1] 中华人民共和国国家药典委员会. 卫生部药品标准（中药成方制剂）[S].第十二册，1997.114
[2] 中华人民共和国国家药典委员会. 中国药典[S]. 北京：化学工业出版社，2000.49.
收稿日期：2008-03-12