[摘要] 目的 观察白花丹参对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的大鼠肺动脉高压(PAH)模型血流动力学及肺组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 SD(sprsgue-dauley SD)大鼠一次性皮下注射MCT 60 mg/kg体重,建立PAH动物模型,随机分为正常对照组、模型组和白花丹参水提物给药组。观察白花丹参水提物对PAH大鼠血流动力学、肺血管重构及肺组织VEGF表达的影响。结果 与模型组相比,给药组大鼠平均肺动脉压(mPAP)、右心室收缩压(RVSP)、右心指数及肺组织VEGF表达均显著降低(P 1.6 Western blot法检测肺组织VEGF表达
组织总蛋白的提取及测量:取部分肺组织,充分剪碎,低温液氮研磨后,加到含蛋白酶抑制剂的裂解液中,4℃裂解40min,使其充分裂解,4℃ 12000r/min,离心30min,弃除沉淀,BCA蛋白定量测定法检测上清液蛋白含量。样品分装、贮存于-80℃中待用。Western blot:每份样本上样50μg,SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳:100V电泳 1h。100mA湿法转印40min。室温封闭1h后,一抗1∶500(鼠抗鼠VEGF单克隆抗体)4℃孵育过夜,TTBS洗膜;二抗1∶2000室温孵育2h,TTBS洗膜,BCIP/NBT显色10min。凝胶成像采图,Quantity One软件进行灰度值分析。
1.7 统计学处理
所有的数据结果均采用均数±标准差(χ±s)表示,用SPSS12.0统计软件进行统计学分析,P