摘要：目的：建立白带丸中芍药苷HPLC含量测定方法。方法：固定相：Kromasil 5u 100AC18柱；流动相：乙腈－0.1％磷酸溶液(15：85)；流速：lml・min-1；检测波长：230nm~柱温：室温。结果：该方法线性范围为0.3878～1.55lμg(r=0.9996，n＝9)，平均加样回收率为99.78％，RSD为0.36％(n＝9)。结论：本方法准确，简便灵敏，可靠，可用于该制剂的质量控制。
关键词：高效液相色谱法；白带丸；芍药苷
中图分类号：R927.2
文献标识码：A
文章编号：1007－2349(2007)07－0035－02
白带丸由黄柏(酒炒)、椿皮、白芍、当归、香附(醋制)5味中药材组成，具有清热，除湿，止带的功效，用于湿热下注所致的带下病。中国药典2005版一部只对其盐酸小檗碱的含量进行测定，为更好地控制产品质量，完善和提高其质量标准，现对芍药苷的含量进行测定。芍药苷的含量测定方法已报道的主要有薄层层析法，薄层扫描法，紫外分光光度法，正交函数分光光度法，高效毛细管电泳法，反相高效液相色谱法及高效液相色谱法。本文以高效液相色谱法测定白带丸中芍药苷的含量作为评价制剂质量的一个指标。
1 仪器与试药
1．1仪器Agilent 1100系列高效液相色谱仪，包括：四元泵，真空脱气机，自动进样品，VWD检测器(可变波长检测器)，Agilent 1100LC化学工作站；赛多利斯BP211D电子天平。
1．2试药芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所提供，批号110736～200422，含量测定用)，白带丸(厂家：福州海王金象中药制药有限公司，生产批号：040954，041056，050816)，乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：Kromasil 5u 100AC,8柱(250×4.6ram)；流动相：乙腈－0.1％磷酸溶液(15：85)；流速：lml・min-1；检测波长：230nm；柱温：室温；进样体积：l0ul(自动进样)；理论塔板数：按芍药苷峰计算不得低于2000。
3 方法与结果
3．1对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品10.34mg，加稀乙醇制成每lml含5.17×10-2mg的溶液，摇匀，即得。
3．2供试品溶液的制备取本品约0.5g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，密塞，称定重量，超声处理20min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
3．3线性关系考察 分别精密吸取对照品溶液7．5，10，12.5，15，17.5，20，22.5，25，30tA注入高效滤相色谱仪中，按上述色谱条件进行测定，以峰面积(mAU)Y对应芍药苷进样量(μg)X进行回归分析，得回归方程：Y=1446.34X+44.41，r=0.9996(n=9)表明芍药苷在0.3878～1.551g范围内具有良好的线性关系。标准曲线见图1。
3．4精密度试验分别精密吸取芍药苷对照品溶液10μl，连续重复进样6次，结果峰面积的RSD为0.18％(n=9)，表明芍药苷进样精密度良好。
3．5重现性试验取同一生产批号(041056)的样品，按上述样品溶液制备方法和色谱条件进行6次平行测定，计算芍药苷的平均含量为2.902mg・g-1，RSD=0.54％(n＝6)，表明本法测定的重现性良好。
3．6稳定性试验取同一生产批号(041056)的供试品溶液，分别在0、2、4、8、12及24h进样10μl，测定峰面积，结果芍药苷平均含量为2.90mg・g-1RSD=0.43％(n=6)，表明样品溶液放置24h内稳定。
3．7回收率试验取已知含量的同一生产批号(041056)的样品，采用加样回收试验，分别以样品量的80％，100％，120％的比例精密加入芍药苷对照品，按样品测定项下的方法测定含量，得平均回收率为99.78％，RSD＝0.36％(n＝9)，结果见表1。
3．8样品测定分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，记录峰面积，计算含量，结果3个批号(040954，041056，050816)的芍药苷含量(nag・g-1)分别为3.88，3.22，7.70。
3．9干扰试验模拟处方制备不含白芍的阴性样品，按供试品溶液制备方法配制1份阴性对照溶液。分别吸取芍药苷对照品溶液，白带丸供试品溶液和阴性对照溶液，按上述测定方法进行测定，结果表明其他各味药材不干扰芍药苷的测定见图2～图4。
4 讨论
4．1流动相的选择文献报道的高效液相色谱法测定芍药苷的方法较多，多用流动相分别为乙腈：水(12:88)，水：甲醇(60:40)等系统，分离效果都不好，本实验中考察了甲醇：水(30:70)，乙腈：水(17:83)等流动相，但分离也不佳，峰形差，而乙腈－0.1％磷酸溶液(15：85)可使样品中芍药苷峰与杂质峰完全分离。参照《中国药典》2005年一部白芍，逍遥散等含量测定项下芍药苷的参数及本试验结果，规定芍药苷峰的理论塔板数不低于2000。
4．2结果评价实验结果表明，本实验所采用测定方法测定芍药苷，重现性良好，回收率高，且在该色谱条件下，芍药苷进样精密度良好，故该法结论可靠，可作为白带丸的质量控制标准。