药敏试验怎么做 856份临床标本细菌培养结果与药敏试验分析

  【摘要】目的:总结我院2004~2007年856份临床标本的培养结果及药敏状况,以指导临床合理使用抗生素。方法:对临床送检856份标本中分离出的634株病原菌分类、药敏试验结果进行回顾性分析。结果:634株病原菌中革兰阳性菌115株,占18.1%,革兰阴性菌319株,占50.3%,真菌200株占31.5%。白色念珠菌、大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠杆菌属、沙门菌属、肠球菌属、变形杆菌属为主要细菌,感染部位以呼吸道、血液、泌尿道、皮肤软组织为多。常见G+、G一菌的耐药性有上升趋势,且其有多重耐药性。结论:临床抗生素使用中的耐药问题十分严峻,应定期监测区域内细菌的耐药变化,依据药敏试验结果合理使用抗生素,指导临床合理用药。
  【关键词】细菌培养;药敏试验;抗生素
  文章编号:1009-5519(2008)17-2631-02 中图分类号:R446 文献标识码:B
  
  为了解我院医院感染的主要病原菌及抗生素的合理使用,对2004~2007年856例医院感染病例进行了统计,并对部分抗生素的药敏试验进行了分析,现报道如下。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 菌株来源:2004~2007年我院确诊为各类感染的病例。采用回顾性调查的方法,以符合卫生部医政司《医院感染诊断标准》的医院感染病例为基础材料,将856例各类标本包括血、尿、分泌物、脓液、胸、腹腔积液,咽拭子、胆汁、脑脊液、引流液等。菌株由本院检验科细菌室分离鉴定,同时对标本中分离出的病原菌进行药敏分析。
  1.2 分离鉴定与药敏:按临床微生物学操作规程对各种标本接种培养,用阳光微生物半自动分析仪(型号:SS-100010型)做菌株鉴定以及药敏试验,少数不能上机鉴定的菌株,采用微量生化管法进行鉴定。检测卡所检测的细菌以《全国临床检验操作规程》1997年12月版本为基础选定。
  
  2 结果
  
  2.1 634株病原菌菌属构成比:临床标本中分离的634株细菌分属20个菌属67个菌种。其中革兰阳性菌(G+)占18.1%,革兰阴性菌(C-)占50.3%,真菌占31.5%。
  115株G+菌属及分布特征包括名称(菌株数、%):葡萄球菌属(92、80.0%);肠球菌属(12、10.4%); 链球菌属(8、7.0%); G+菌(2、1.7%);微球菌属(1、0.9%)。葡萄球菌属中金黄色葡萄球菌为54.3%,表皮葡萄球菌20.7%,溶血葡萄球菌为19.6%;链球菌属中肺炎链球菌50%,草绿色链球菌50.0%,肠球菌属中粪肠球菌50.0%,屎肠球菌50.0%。
  319株 C-菌属及分布特征包括名称(菌株数、%):埃希菌属(80、25.1%);假单胞菌属(79、24.8%);克雷伯菌属(47、14.7%);不动杆菌属(47、14.7%);肠杆菌属(19、6.0%);沙门菌属(12、3.8%);变形杆菌属(6、1.9%);沙雷菌属(5、1.6%);气单胞菌属(4、1.3%);枸橼酸杆菌属(4、1.3% );摩根菌属(4、1.3%);产碱杆菌属(3、0.9%);黄杆菌属(2、0.6%);普罗威登斯菌属(1、0.3%);耶尔森菌属(1、0.3%);其他(5、1.6%)。假单胞菌属中铜绿假单胞菌69.0%,嗜麦芽寡养单胞菌21.0%;埃希氏菌属中91.0%为大肠埃希菌;克雷伯菌属中产酸克雷伯菌56.0%,肺炎克雷伯菌43.0%;不动杆菌属中鲍曼不动杆菌84.0%,洛菲不动杆菌10.0%;肠杆菌属中阴沟肠杆菌75.0%,产气肠杆菌16.1%。
  200株真菌分布特征包括名称(菌株数、%):白色念珠菌(156、78.0%);其他(22.0%)。
  2.2 856株病原菌组织分布特点:856株病原菌来自于呼吸道50.0%,血液20.0%,泌尿道21.0%,皮肤、软组织2.0%,胸腹腔积液、胆汁、脑脊液等6.9%,其他0.1%。分布在前十位致病菌依次是:白色念珠菌、大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠杆菌属、沙门菌属、肠球菌属、变形杆菌属。
  2.3 药敏情况:检出菌耐药性强且广谱耐药,具体结果见表1。
  
  
  3 讨论
  
  医院感染理论认为,导致医院感染的病原菌大部分为毒力弱或平时无毒的微生物,大肠埃希氏杆菌、肺炎克雷伯氏菌除了在肠道不致病外,其他部位均可致病,由于宿主免疫力低下,生态失调,耐药菌株异常定值,均可造成感染的发生。
  病原菌的菌群变化随着年代的不同而变迁,上世纪60年代以金黄色葡萄球菌,草绿色链球菌和G-菌3个菌群为主,而70年代以来G-菌有逐渐增多的趋势,表皮葡萄球菌引起的菌血症比例也越来越大[1]。
  候晓娜等[2]报道沈阳地区1999~2001年G+菌检出率为17.1%~22.0%,G-菌检出率为78%~82.1%。皇甫秋霞等[3]报道,对378例标本细菌培养,其中G+阳性菌128株(33.9%),G-菌220株(58.2%),真菌30株(7.9%)。主要病原菌依次为大肠埃希氏杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌、金黄色葡萄球菌、链球菌;易感染的部位依次为呼吸系统、泌尿系统;易感人群为老年人、患严重基础疾病者。李来等[4]报道承德地区1 393例细菌培养中G+菌占22.9%,G-菌占67.98%,真菌占9.12%。
  总结我院2004~2007年856份临床标本的培养结果来看,634株病原菌中G+菌115株,占18.1%,G-菌319株,占50.3%,真菌200株占31.5%。白色念珠菌、大肠埃希菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、肠杆菌属、沙门菌属、肠球菌属、变形杆菌属为主要细菌,感染部位以呼吸道、血液、泌尿道、皮肤软组织为多。常见G+、G-菌的耐药性有上升趋势,且其有多重耐药性。其中,真菌的检出率明显高于北方地区,可能与广东地区天气热、潮湿有关。
  目前,临床滥用抗生素非常普遍,如何监测临床常见细菌的耐药性现状,预测细菌耐药性变迁,如何根据细菌耐药性监测制定合理使用抗生素都已成为临床医生要重视的问题之一。本组的药敏试验结果表明主要致病菌对青霉素、红霉素耐药率已达70%以上,G+球菌对万古霉素、米诺环素、呋喃妥因、利福平较为敏感,而G-杆菌对美洛培南、亚胺培南、阿米卡星、妥布霉素的敏感性较高。临床感染患者应尽量根据细菌培养结果。合理应用敏感杭生素,若无细菌学参考依据,在应用青霉素类、红霉素效果不理想的情况下,可酌情考虑使用氨基糖甙类、喹诺酮类、利福平等或者使用万古霉素。同时为避免产生类似于对青霉素类药物等耐药性逐年上升现象应尽量避免滥用抗生素,尤其是目前耐药率很低的万古霉素。耐药菌的产生势必增加住院患者及医务工作者受耐药菌感染的机会,增加治疗难度。
  
  参考文献:
  [1] 郭玉芬,甄景慧,张美和,等.北京儿童医院血培养检出菌17年的变迁及耐药性探讨[J].中华儿科杂志,2000,38(12):750.
  [2] 侯晓娜,丁雪松,付伟听,等.医院住院患者临床分离菌的构成及耐药性调查[J].中国抗感染化疗杂志,2003,3(2):104.
  [3] 皇甫秋霞,周建生,史炳娥.378例感染细菌培养及药敏分析[J].齐鲁医学检验,2005,16(1):55.
  [4] 李 来,唐世荣,张 敏.等临床常见致病菌现状分析[J].河北医学杂志,2002,8 (1):28.
  收稿日期:2008-05-15

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