【摘要】 目的 分析e抗原定量与HBV-DNA及ALT的相关性,探讨三者之间的关系。方法 应用时间分辨荧光免疫分析法和荧光定量PCR法及丙氨酸氨基转移酶法分别对226例乙肝患者血清e抗原和HBV DNA及ALT进行测定,并按e抗原测定结果分成5组。结果 ①乙肝患者血清e抗原定量与HBV-DNA含量呈等级相关,(相关系数0.514,P0.05);②e抗原定量与ALT水平之间不存在相关关系。结论 e抗原定量与HBV-DNA含量有很好的一致性,可反映体内HBV的复制情况,但e抗原定量不能代替肝功能的检测,只有同时检测e抗原定量和ALT水平才能为判断HBV感染、复制及肝功能损伤程度提供有价值的诊断依据。
【关键词】乙型肝炎病毒;e抗原定量;HBV-DNA;丙氨酸氨基转移酶
The correlative analysis among HBeAg,HBV-DNA and ALT in persons infected by hepatitis B virus
ZHONG Qiao-hua,CHEN You-jia,XIE Xi-na,et al.Department of Laboratory,People’s Hospital of JieYang,Jieyang 522000,China
【Abstract】 Objective To explore the relationship between HBeAg concentration with HBV-DNA and ALT value.Methods The quantity of HBV-DNA and serum HBeAg,ALT concentration of 226 hepatitis B patients were detected by fluorescence quantitative PCR(FQ-PCR)and time-resolved fluorescence immunity analysis systematic(TRIFA)and enzyme respectively at the same time.5 groups were divided according to their HBeAg results.Results ①The levels of HBeAg and HBV-DNA showed rank correlation(0.514,P0.05).Conclusion HBeAg is identical tendency with HBV-DNA,and it can be used to reflect the HBV replication,but can not take the place of the hepatic function detected.So analyzing HBeAg and ALT together would be advisable to the infection of HBV、the virus replication statement and the hepatic function degree of injury.
【Key words】 Hepatitis B virus; HBV e antigen concentration; HBV-DNA; ALT
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作者单位:522000广东省揭阳市人民医院检验科
目前,对于乙肝患者体内HBV活动期及抗病毒疗效观察多使用血清e抗原与HBV-DNA等指标[1],由于HBV-DNA检测技术本身对于实验室条件要求较高,难以普及,而e抗原检测具有操作简单,耗时短,成本低,易于自动化等优势,越来越受到人们的重视。为进一步探讨e抗原定量与HBV-DNA含量及ALT水平之间的关系,明确e抗原定量对乙肝病毒复制和肝内炎性反应的评估价值,作者对226例乙肝患者血清e抗原定量和HBV DNA及ALT水平进行比较分析,现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 226例乙肝患者均为2007年1月至2009年6月来广东省揭阳市人民医院就诊的门诊和住院患者,其中男151例,女75例,年龄6~69岁。病例诊断均符合2000年9月西安全国第十次病毒性肝炎及肝病学术会议修订的病毒性肝炎防治方案的标准[2]。并经临床及实验室多方面检查排除甲、丙、丁、戊等型病毒性肝炎及自身免疫性肝炎、肝癌。
1.2 检测方法
1.2.1 血清e抗原定量 采用上海新波公司Anytest2000时间分辨免疫荧光分析系统(TRFIA)及其配套试剂盒。并将e抗原定量测定结果分成5组:Ⅰ组:e抗原≤0.03 NCU/ml;Ⅱ组:0.03 NCU/ml3.75 NCU/ml。操作步骤严格按说明书进行。
1.2.2 血清HBV-DNA定量 采用杭州大和Line-Gene PCR扩增仪,试剂由广州达安基因公司提供,测定结果进行对数转换。操作步骤严格按说明书进行。
1.2.3 ALT测定 采用日立7170A全自动生化分析仪,试剂由浙江东瓯津玛生物科枝有限公司提供,测定结果ALT>40 U/L为阳性。操作步骤严格按说明书进行。
1.3 统计学方法 计量资料用均值±标准差(x±s)表示,率比较采用χ�2检验,e抗原定量与HBV-DNA含量的关系采用Spearman相关性分析。所有资料均采用SPSS13.0统计软件进行处理。
2 结果
2.1 乙肝患者血清e抗原定量与HBV-DNA含量呈等级相关,(相关系数0.514,P0.05)。
2.2 不同e抗原分组之间HBV-DNA含量及ALT阳性率的比较见表1。
表1
不同e抗原分组之间HBV-DNA含量及ALT
阳性率的比较(x±ss)
e抗原分组NHBV-DNA含量�(Lg(HBV-DNA)ALT阳性率�(ALT>40 U/L)
Ⅰ组263.33±0.7019.2%�***�
Ⅱ组313.55±0.99�*22.6%
Ⅲ组344.47±1.62�*41.1%
Ⅳ组665.78±1.48�*33.3%
Ⅴ组695.80±1.62�**�33.3%
注:�*表示Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各组之间比较P0.05,�***�表示与其他各组比较P>0.05
3 讨论
血清HBV-DNA阳性检出通常被当作HBV感染和复制的金标准[3]。本研究资料表明,226例乙肝患者血清e抗原定量与HBV-DNA含量之间有很好的一致性,两者经统计学分析呈等级相关(相关系数0.514,P0.05),表明e抗原定量在3.75 NCU/ml以上时与HBV-DNA含量关系不大。
本次研究资料还发现,在e抗原分组第Ⅰ组(e抗原≤0.03NCU/ml)有2例HBV-DNA定量为10�6~10�7拷贝/ml,3例HBV-DNA定量为10�4~10�5拷贝/ml,且发现这些患者肝组织有炎性反应(ALT>79 U/L),同时,采用酶联免疫吸附试验对上述标本进行定性检测,均为e抗原阴性或e抗体阳性,说明e抗原阴性或转阴时机体内HBV并未完全清除,还可能存在低水平复制;或者是HBV前C区发生了突变,导致不能产生e抗原,但却不影响HBV的复制与传播[4],对于这种情况只能通过检测患者血清的HBV-DNA。有资料报道,这种HBV前C区变异和宿主对变异HBV改变了的免疫状态,可能是HBV感染慢性化、重症化甚至癌变的一个重要因素[5]。因此,对血清e抗原定量水平低或e抗原定性阴性,而HBV-DNA定量水平高的患者在临床上尤其应引起重视。
乙肝患者的肝细胞损伤是一个极为复杂的病理过程,其程度与HBV的复制活跃程度并无直接的相关关系[6]。本资料显示的ALT水平与e抗原定量无相关性亦可得出相应的结论。因此不能只依据血清ALT水平来推断HBV在体内的复制活跃程度,e抗原定量亦不能代替肝功能的检测,只有同时检测e抗原定量和ALT水平,才能为判断HBV感染、复制及肝功能损伤程度提供有价值的诊断依据。
参 考 文 献
[1] 魏来.HBV标志物定量和标准化是临床检测的方向.中华检验医学杂志,2009,32:967.
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