隐形眼镜以其与框架镜不同的独特优点而受到消费者的青睐。随着隐形眼镜的普及和发展，因使用隐形眼镜所致的并发症呈上升趋势［1］。用于镜片清洁与消毒的隐形眼镜护理液，其消毒效果对安全使用至关重要。然而影响护理液消毒效果除含有的杀菌成分以外，其pH值与渗透压的改变对消毒效果影响方面的研究甚少。为此，我们对同一杀菌成分的隐形眼镜护理液在pH值、渗透压和消毒时间改变时对消毒效果的影响进行了观察。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1试验菌株以金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、大肠杆菌（8099）、铜绿假单胞菌（ATCC9027）为细菌繁殖体试验菌株；酵母菌以白色念珠菌（ATCC10231）为试验菌株。以上菌株由卫生部药品生物制品检定所提供；茄科镰刀霉菌（ATCC36031）由中国普通微生物菌种保藏中心提供。
1.1.2中和剂含0.5%吐温-80、0.07%卵磷脂的磷酸盐缓冲液（PBS）。
1.1.3稀释液0.03mol/L的PBS。
1.1.4隐形眼镜护理液不同pH值和渗透压的隐形眼镜护理液，由爱尔康眼科产品有限公司提供。
1.2方法
1.2.1菌悬液的制备被测细菌繁殖体与酵母菌（白色念珠菌）取第3－5代18－24h被试菌株新鲜培养物，用0.03mol/L的PBS洗下，稀释成含菌量为1.0×10�7－1.0×10�8cfu/mL的菌悬液；取茄科镰刀霉菌菌种第3代斜面培养物接种马铃薯葡萄糖琼脂斜面，25℃培养5－7d,用马铃薯葡萄糖肉汤下斜面上的培养物接种罗氏瓶，置25℃培养5－7d，再以0.05%(v/v)吐温-80生理盐水刮洗下罗氏瓶培养物制备成1.0×10�7－1.0×10�8cfu/mL茄科镰刀霉菌悬液。
1.2.2中和剂鉴定试验依据GB19192-2003附录D［2］以[]�0.03mol/L的PBS制备金黄色葡萄球菌、白色念珠菌悬液。以�0.05%(v/v)吐温-80生理盐水制备茄科镰刀霉菌悬液。试验结果：第6、7、8组无菌生长，第3、4、5组组间菌落数相差不超过15%，第1组不长或菌落不少于第2组，表明所选中和剂及其浓度适宜。
1.2.3悬液定量杀灭试验按GB19192-2003附录A，对不同pH值与渗透压的护理液进行悬液定量杀灭试验。试验温度在19－20℃，选择试验菌株代数在第5代。试验重复3次。用无菌吸管吸取护理液原液10mL于无菌的试管中，加入各种试验菌悬液0.1mL(回收菌落数在1.0×10�5－1.0×10�6�cfu/mL)。评价依据为对繁殖体的杀灭率＞99.9%，对酵母菌和霉菌的杀灭率＞90%为合格。
1.2.4pH值与渗透压测定按GB19192-2003用PH值S-3C型酸度计与冰点渗透压计测定样品的pH值和渗透压。
1.3资料分析
用SPSS11.0软件进行资料统计处理。
2结果
2.1不同渗透压的护理液对细菌繁殖体的消毒效果
pH值为7.8时，渗透压在220－260mOsm/kg范围变化的护理液，作用4－6h，对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的平均杀灭率均为100.00%。
2.2不同渗透压的护理液对酵母菌和霉菌的消毒效果
pH值为7.8时，渗透压变化范围在220－260mOsm/kg的护理液，作用4、6、24h，对白色念珠菌和茄科镰刀霉菌的平均杀灭率>99.00%；护理液在最高渗透压340mOsm/kg与最低渗透压200mOsm/kg时，作用不同时间（4、6和24h），对白色念珠菌的杀灭率均≥99.90%（表1）。
2.3不同pH值护理液消毒效果
pH值在7.8－8.2范围变化的护理液，作用4－6h，对铜绿假单胞菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的平均杀灭率均为�100.00%。
表1pH值7.8时不同渗透压的护理液对酵母菌和霉菌的消毒效果
渗透压
（mOsm/kg）[]白色念珠菌杀灭率（%）4h[]6h[]24h[]对照菌数
（cfu/mL）[]茄科镰刀霉菌杀灭率（%）4h[]6h[]24h[]对照菌数
（cfu/mL）200[]99.90[]99.97[]99.99[]2.83×10�6[]99.80[]99.97[]100.00[]1.10×10�6
白色念珠菌：不同渗透压比较，F=5.216,P=0.001,不同时间比较，F=43.232，P=0.033；茄科镰刀霉菌：不同渗透压比较，F=4.387,P=0.049,不同时间比较，F=10.860，P=0.0132.4不同pH值护理液对酵母菌和霉菌的消毒效果
pH值在7.8－8.2范围变化的护理液,作用4－24h，对白色念珠菌和茄科镰刀霉菌的平均杀灭率>99.00%，但不同时间的平均杀灭率差异有统计学意义（表2，表3）。
白色念珠菌：不同pH值比较，F=1.886,P=0.245；不同时间比较，F=21.571,P=0.006；茄科镰刀霉菌：不同pH值比较，F=4.540,P=0.075；不同时间比较，F=6.834,P=0.047
渗透压为340mOsm/kg时，pH值为6.5、7.8的护理液,作用4、6、24h，对白色念珠菌和茄科镰刀霉菌的平均杀灭率>99.00%；作用4h，对白色念珠菌的杀灭率>99.90%；作用24h,对茄科镰刀霉菌的平均杀灭率>99.90%（表4）。
白色念珠菌：不同pH值比较，F=3.546,P=0.200；不同时间比较，F=94.727,P=0.010；茄科镰刀霉菌：不同pH值比较，F=4.007,P=0.183；不同时间比较，F=8.934,P=0.101
3讨论
随着隐形眼镜应用的日益增多，因使用护理液而引发眼睛霉菌的感染时有报道［3］。在美国FDA和CDC发布的2006年公众健康预告中，由于使用隐形眼镜护理液而引发严重真菌性角膜炎的报告数量正在上升。全美国约3000万人使用隐形眼镜，据估计微生物性角膜炎约为每1万名隐形眼镜使用者中4－21例，其中真菌性角膜炎占微生物性角膜炎的35%［4］。2006年，亚洲也报道使用隐形眼镜护理液引起茄科镰刀霉菌感染事例。此类真菌性感染严重时可能导致患者失明。因此隐形眼镜护理液的消毒效果显得尤为重要，特别是对酵母菌与霉菌的消毒效果。
我们用杀菌成分相同的护理液观察比较不同pH值、渗透压和不同作用时间对消毒效果的影响。尽管我们在试验中观察到护理液的消毒效果均能达到GB19192-2003规定的隐形眼镜护理液卫生标准，但试验结果显示，当pH值在6.5－8.2，渗透压在200－340mOsm/kg范围变化时，作用时间4h或6h对细菌繁殖体的杀灭率均为100.00%。说明护理液的pH值和渗透压对细菌繁殖体的消毒效果影响不大。当pH值为7.8时，渗透压在200－340mOsm/kg范围的护理液,不同的作用时间对白色念珠菌与茄科镰刀霉菌的消毒效果差异有统计学意义。同一渗透压的护理液，pH值在6.5－8.2的范围内改变时，对白色念珠菌与茄科镰刀霉菌的杀灭率差异无统计学意义。但不同作用时间的杀灭率差异有统计学意义，并且随着时间的增加，其灭菌效果更佳。说明杀菌成分相同的护理液，尽管杀灭率都能达到国标的要求，但当渗透压与作用时间改变时，其对白色念珠菌、茄科镰刀霉菌的杀灭率不同，随着时间的延长更能体现其最佳消毒效果。因此，确保足够的消毒时间，能更有效地预防酵母菌和霉菌的感染。
4参考文献
［1］曲建青.隐形眼镜与并发症研究［J］.河北医学，2001，7（10）：921-922.
［2］GB19192-2003，隐形眼镜护理液卫生要求［S］.
［3］使用隐形眼镜与真菌性角膜炎有关的公众健康预通告［N］.中华医学信息导报，2006，21（9）：3.
［4］SealDV,KirknessCM,BenneetHG,etal.KeratitsStudyGroupPopulaion-basedcohortstudyofmicrobialkeratitiainScotland:incidenceandfeatures［J］.ContLensAnteriorEye，1999，22(2):49-57.
(收稿日期：2007-05-08)
文章编号：1004-9231(2007)06-0296-02
本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。