郑英亮，颜东方，李 沛，李 库，彭 颖
（安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌 443003）
酵母β -葡聚糖是一种重要的细胞壁结构多糖,具有多种生物活性功能[1-2]。由于酵母β -葡聚糖能够广泛应用于医疗、食品及化妆品等领域，成为近年来研究的热点，但天然酵母β -葡聚糖水溶性较差，也影响了其在医疗、食品和化妆品行业中的应用。β -葡聚糖分布广泛，具有免疫刺激、抗炎症、抗感染、降低胆固醇、抗辐射、治愈创伤等生物学活性和医药特性[3-4]。研究了水溶性酵母β 葡聚糖的制备工艺，葡聚糖分子量分布及抗炎症活性，发现该水溶性酵母β -葡聚糖葡聚糖具有较好的抗炎症活性，可作为功能饮料的原料使用[5]。
1.1 仪器与耗材
酵母-β -葡聚糖，安琪酵母股份有限公司提供；
小鼠巨噬细胞RAW264.7，武汉普诺赛生命科技有限公司提供；
CCK-8 型试剂盒，武汉菲恩生物科技有限公司提供；
BSA124S 型电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司提供；
YXQ-LS-50A 型立式压力蒸汽灭菌锅，广州市深华生物技术有限公司提供；
L-2000 型高效液相色谱仪，日本HITACHI 公司提供。
1.2 葡聚糖的制备工艺
酵母细胞→灭活→分离得到细胞壁→加葡聚糖酶酶解→过滤→上清液干燥→碱溶盐沉纯化→酵母-β-葡聚糖→过滤膜得到分子量小于107Da 分子量的水溶性酵母-β -葡聚糖→喷干→利用企标QB/T 4572—2013/6.3 的方法检测有效含量达到80%以上的产品方为合格品。
1.3 葡聚糖分子量分布测定方法
采用高效凝胶过滤色谱法测定，检测分子量范围为1～1 000 万。
1.4 酵母-β -葡聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖活力的影响
采用不同质量浓度（25，50，100，200，400μg/mL）的酵母-β -葡聚糖处理细胞24 h，并利用CCK-8试剂检测细胞活力。
1.5 酵母-β -葡聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌NO 的影响
在质量浓度分别为100，200，400 μg/mL 酵母-β -葡聚糖作用后，观察NO 释放量（p＜0.05，相比于LPS 对照组）的变化。如果NO 释放量降低，表明酵母-β -葡聚糖可以改善LPS 诱导的RAW264.7中NO 释放增高的情况，降低炎症反应。
1.6 抗炎症功能饮料的制备工艺
将水溶性酵母-β -葡聚糖、柠檬酸、白砂糖、食盐和水按一定比例混匀，然后均质-灭菌-灌装。经检测，该产品符合国标GB 7101—2015 要求。
2.1 水溶性酵母-β -葡聚糖理化指标
理化指标见表1。
表1 理化指标 /%
由表1 可知，酵母-β -葡聚糖的葡聚糖含量在80.0%～95.4%，杂质较少，且水分含量极低，产品呈干燥的粉末状。
2.2 葡聚糖分子量分布
葡聚糖分子量分布见表2。
表2 葡聚糖分子量分布 /%
由表2 可知，酵母-β -葡聚糖的分子量主要分布在≤10 000 Da，占比达到67.98%。此分子量范围的酵母-β -葡聚糖的水溶性极好，因此更适合用于饮料等食品中。
2.3 酵母-β -葡聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7增殖活力的影响
增殖活力试验结果见图1。
图1 增殖活力试验结果
由图1 可知，不同质量浓度酵母-β -葡聚糖对RAW264.7 细胞的增殖活力无显著（p＞0.05）抑制影响，表明低于400 μg/mL 的酵母-β -葡聚糖对RAW 264.7 细胞无毒。因此，将酵母-β -葡聚糖的最高作用质量浓度设定为400 μg/mL。
2.4 酵母-β -葡聚糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7分泌NO 的影响
NO 分泌结果见图2。
由图2 可知，RAW264.7 在LPS 刺激24 h 后NO的释放量（p＜0.05，相比于空白组）显著提高。在添加质量浓度分别为100，200，400 μg/mL 酵母-β -葡聚糖作用后，NO 释放量（p＜0.05，相比于LPS 对照组）均显著降低，并呈剂量依赖性。这表明酵母-β -葡聚糖可以改善LPS 诱导的RAW264.7 中NO 释放增高的情况，降低炎症反应。
2.5 抗炎症功能饮料的配制结果
功能饮料见图3。
图3 功能饮料
由图3 可知，由1.6 的方法制备的功能饮料颜色呈淡卡其色，半透明状，透光性和流动性较好，口感酸甜适中，带咸味，因为使用的酵母-β -葡聚糖溶解性较好，无特殊风味，因此制备的饮料具有较好的口感与风味。
从面包酵母细胞壁中提取的酵母-β -葡聚糖，是一种天然的免疫健康成分。在人类免疫系统进化的漫长过程中，能够透过识别病原体细胞表面普遍存在的某些分子，从而具备杀灭酵母菌和真菌的能力，但面包酵母中提取酵母-β -葡聚糖的抗炎症活性没有相关研究。
试验研究了水溶性酵母-β -葡聚糖的制备工艺，葡聚糖分子量分布及抗炎症活性，表明该葡聚糖有较好的抗炎症活性，因此用其作为原料制备的功能饮料也有较好的抗炎症活性。
猜你喜欢 葡聚糖水溶性分子量 葡聚糖对原糖精炼品质及产品质量的影响中国调味品(2022年6期)2022-06-05沥青分子量及其分布与短期热老化性能的关联性研究石油沥青(2022年2期)2022-05-23一种水溶性腐植酸有机肥的制备及产物性质研究中国土壤与肥料(2021年5期)2021-12-02化肥减量条件下水溶性追肥比例对烤烟产质量的影响中国土壤与肥料(2021年5期)2021-12-02β-1，3葡聚糖对肉鸡免疫器官指数和抗氧化能力的影响乡村科技(2021年12期)2021-09-06加入超高分子量聚合物的石墨烯纤维导电性优异纺织科学研究(2021年7期)2021-08-14葡聚糖对原糖精炼过程的影响中国调味品(2020年7期)2020-07-25右旋糖酐的分子量检测手段及应用海峡科技与产业(2019年4期)2019-10-26重庆市四季PM2.5化学组分分析当代旅游(2019年3期)2019-09-19α-葡聚糖酶在甜菜制糖中的试验研究中国糖料(2019年1期)2019-02-13