摘要：目的：建立舒心片中淫羊藿苷含量的测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱柱：Phenomenex BOS C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈－水(78:22)；流速：1Ml.min-1；检测波长：270hm；柱温：25℃。结果：淫羊藿苷在0.1972～1.972μg范围内线性关系良好，r=0.9994；平均回收率为99.91％，RSD=2.75％。结论：该方法简便、灵敏、准确，可为淫羊藿苷在复方剂中的含量测定提供依据。
关键词：舒心片；淫羊藿苷；含量测定+HPLC
中图分类号：R927.2
文献标识码：A
文章编号：1007-2349(2009)06-0052-02
舒心片为本院医院制剂。由丹参、淫羊藿、红参等药组成，具有补元气、活血脉的功效，用于治疗冠心病。淫羊藿为方中西药，而淫羊藿苷为其主要活性成分，因此选用淫羊藿苷作为含量测定的指标成分。运用高效液相色谱方法测定淫羊藿苷含量多有报道，方法比较成熟，因此笔者选用高效液相色谱法为舒心片中淫羊藿苷的含量测这建立了一种分离效率高、稳定性好、分析速度快的方法，为控制制剂质量提供了可靠的方法。
1 仪器与试药
Agilent 1100型高效液相色谱仪，柱温箱，二级管阵列检测器(DAD)，Agilent-Chemstation化学工作站。舒心片，江门市新会区中医医院制，批号20051015、2051223、20060206；阴性对照样品(自制)；淫羊藿苷对照品(批号110373－200312，中国药品生物制品检定所)。乙腈为色谱纯，液相用水为超纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 phenomenex BOS C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，乙腈－水(78:22)；柱温：25℃；检测器：DAD,检测波长：270nm；流速：1mL／min；进样量：20μL。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不低于2000。在上述条件下，淫羊藿苷分离良好，空白无干扰。见图1。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含淫羊藿苷98.6ug的溶液，作为对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备 取本品5片(0.5g／片)研细，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入95％乙醇50mL，称定重量，超声(250W，40kHz)处理1h，放冷，称重，用95％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，水浴蒸干，加95％乙醇使溶解，置5mL量瓶中，加95％乙醇至刻度，摇匀，微孔滤膜滤过，即得。
2.4 阴性溶液的制备 原方去淫羊藿，按照制备工艺方法制备空白制剂。按供试品制备方法制备阴性对照溶液。依含量测定法处理和分析，空白样品色谱在淫羊藿苷峰相应保留时间没有干扰峰。
2.5 线性关系考察 取对照品溶液分别进样2、4、8、12、16、20μL，记录色谱峰面积。以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程：Y＝1259.3X+10.379，相关系数r=0.9994，表明淫羊藿苷在0.1972～1.972μg之间呈良好的线性关系。
2.6 精密度实验 精密量取对照品溶液10μL，连续进样5次，测定淫羊藿苷的峰面积，结果平均峰面积为1277.62，RSD＝0.33％，结果表明仪器精密度良好。
2.7 稳定性试验 取供试品溶液，分别在0、1、2、3、4、12h进样20μL，记录峰面积，结果淫羊藿苷平均峰面积为1566.1，RSD=1.53％，表明供试品溶液在12h内稳定。
2.8 重复性试验 精密称取同一批号(20050801)5份，按供试品溶液制备方法处理，测定，淫羊藿苷的平均含量为0.3077mg／片，RSD＝1.49％，结果表明本方法重现性良好。
2.9 回收率试验 取已知含量的舒心片样品1g，共5份，精密称定。分别加入与样品中淫羊藿苷含量近相等的淫羊藿苷对照品，按供试品溶液的制备方法操作，结果见表1，平均回收率为99.92％，RSD=2.75％，结果表明该方法具有良好的回收率。
2.10 样品的含量测定 取不同批号舒心片样品各5片，研细，按供试品溶液制备方法处理，在上述色谱条件下分析，计算含量结果见表2。
3 讨论
在提取溶液媒选择时，分别比较了50％乙醇、70％乙醇、95％乙醇3种溶剂超声，制得供试品溶液，通过比较后，95％乙醇成分极性较小可减少干扰，确定以95％乙醇为提取溶媒。
实验比较了95％乙醇加热回流提取或超声提取，结果超声提取与回流提取比较无明显差异，以超声提取简便；通过比较提取溶媒用量，提取时间，确定提取方法为95％乙醇50倍量超声提取1h。
本文建立了采用HPLC法测定舒心片中淫羊藿苷含量的测定方法，方法简便、快速、准确、重现性好，可以为舒心片的质量标准提供依据。
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