【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定白芷及其有效部位中欧前胡素含量的方法。方法：采用Kromasil C18（250×4.6mm，5μm）色谱柱，流动相：甲醇-水（54:46），流速：1.0mL・min-1，检测波长300nm。结果：线性范围是：欧前胡素0.112~1.400μg，r=0.9999（n=5）。平均回收率为101.01%，RSD为1.56%。结论：方法简便、快速准确,重现性好。可作为白芷及其有效部位的质量控制方法。
【关键词】白芷及其有效部位；欧前胡素；高效液相色谱
Determination of imperatorin in Angelicae dahuricae Radix and its effective extract by HPLC
XING Jun-bo，CAO Hong
(Institute for Drug and Instrument Control Health Dept GLD of PLA, Beijing 100071, China)
【Abstract】Objective: To establish a method for determination of imperatorin in Angelicae dahuricae Radix and its effective extract.Methods: The HPLC system consisted of Kromasil C18 column（4.6mm×250mm, 5μm）, methanol-water（54 : 46）; flow rate was 1.0ml・min-1and detected with UV at 300 nm ; column temperature was 40℃. Results: The linear response ranges from 0.112~1.400?g of imperatorin (r=0.9999, n=5).The recovery of imperatorin is 101.01%, RSD is 1.56%.Conclusion: The method is simple,fast,rapid,accurate and suitable for the determination of preparation and crude material.
【Key words】Angelicae dahuricae Radix; imperatorin; HPLC
白芷为伞形科植物白芷Angelica dahufica Benth．EtHoor．f．的干燥根。具解表散寒，祛风止痛等功效。主要用于感冒头疼，眉棱骨痛等。白芷主要含挥发油、香豆素类等成分，现代药理实验表明白芷中所含欧前胡素为其主要活性成分之一[1-2]，本文建立了制剂及相关药材中欧前胡素高效液相色谱测定方法，以更好控制质量。该法灵敏度高、专属性好、操作简便。
1仪器与试药
高效液相色谱仪：岛津LC-20AT高效液相色谱仪，SPD-20A紫外检测器，LC-solutin色谱工作站。甲醇为色谱纯，水为重蒸水。欧前胡素对照品购自中国药品生物制品检定所。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱：Kromasil C18（250×4.6mm，5?m）；流动相：甲醇-水（54:46）；检测波长：300nm；流速：1.0mL・min-1；柱温：40℃。
2.2供试品溶液的制备取本品细粉约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液滤过，即得。
2.3对照品溶液的制备取欧前胡素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含20?g的溶液。
2.4线性关系的考察精密吸取欧前胡素对照品溶液（0.028mg・ mL-1），分别进样4、6、10、20、50μl，以进样量（μg）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线，计算得回归方程为：Y=1502513.97X-17847.04，r=0.9999
线性范围为：0.112~1.400μg。
2.5样品溶液稳定性试验将待测样品溶液，在室温下贮存，每间隔一定时间进样测定，平均峰面积为380124，RSD为1.05%。
2.6精密度试验取同一批号的白芷有效部位6份，按含量测定方法平行试验，测得平均含量为6.02mg・g-1，RSD为1.88%。
2.7准确度试验称取已知含量的同一批样品约0.05g，精密称定，分别精密加入欧前胡素对照品适量，按正文供试品溶液的制备方法操作，测定含量，知平均回收率为101.01％，RSD为1.56％。
2.8样品测定按上述色谱条件，进行样品测定，以外标法计算含量。结果两批制剂分别为6.02、6.14 mg・g-1；三批药材含量分别为0.92、0.95、0.96mg・g-1。见图1。
3讨论
本文进行了耐用性试验考察，对乙腈-水，及甲醇-水等流动相系统进行了的比较，同时比较了不同类型色谱柱的分离状态和测定结果，结果表明在该色谱条件下，供试液中测定组分能完全分离。
参考文献
[1]何开家，张涵庆. 白芷化学成分及其药理研究进展[J]. 现代中药研究与实践，2008， 22 (3): 59
[2]张翠英 ，李振国 ，王青晓. 白芷饮片HPLC指纹图谱研究[J]. 中药材，2007， 30 (11): 1134
作者简介：邢俊波，男，（1971-），副主任药师，博士，研究方向：中药质量评价和新药研发
基金项目：全军十一五课题“中药白芷止痛活性成分的研制”
注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文