芒种花提取物对四氯化碳致肝损伤小鼠模型的影响 小鼠四氯化碳肝损伤

  摘要:目的:考查芒种花不同提取物对CCl4致肝损伤模型小鼠的保肝作用。方法:小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、芒种花醇提取物大、小剂量组,水提取物大、小剂量组和醇提物加胡黄连醇提物组,分别连续7天灌胃给予相应的受试药物,末次给药后造模小鼠一次性腹腔注射5%CCL花生油10ml/kg染毒,12h后取血检测AST、ALT、LDH。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠AST、ALT升高;与模型对照组比较,给药组AST、ALT值均有降低,LDH值部分降低或改变。结论:芒种花不同提取物对CCl4所致肝损伤小鼠模型有一定保护作用。
  关键词:芒种花;四氯化碳;肝损伤;保护
  中图分类号:R285.5 文献标识码:A
  文章编号:1007-2349(2007)11-0035-02
  
  芒种花为金丝桃科西南金丝桃(Hypericun heny;Levl.etvan)的干燥地上部分,又名栽秧花、土连翘。其性味苦、辛、寒。有清热解毒、利尿解痉之功效。民间用于肝炎、利胆、感冒、痢疾等疾病。笔者用芒种花两种不同溶媒提取物对四氯化碳所致肝损伤小鼠模型进行血清学改变的实验观察,以探索发现和评价芒种花提取物的保肝作用。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 芒种花与胡黄连的药材,购自云南省药材公司,云南中医中药研究所新药中心提供提取物。
  1.1.1 芒种花的醇提取 称取生药材1400g,加90%9000ml乙醇浸泡12h后,回流提取1h,过滤,滤液另器保存,再向药渣中加入70%8000ml乙醇回流提取1h,过滤。合并两次滤液,浓缩至流浸膏(800m1)。并将其置于60℃烘箱中恒温烘至于浸膏(1g干浸膏相当于4.6g生药)。
  1.1.2 芒种花的水提取 称取生药材1400g,加9000ml水浸泡12h后,加热煮沸1h,过滤,滤液另器保存,再向药渣中加入9000ml水煮沸1h,过滤。合并两次滤液,浓缩至流浸膏(400m1),并将其置于60℃烘箱中恒温烘至于浸膏(1g干浸膏相当于5.4g生药)。1.1.3 胡黄连的提取 称取生药材1000g,加90%8000ml乙醇浸泡12h,过滤,滤液另器保存,再向药渣中加入70%8000ml乙醇回流提取1h,过滤。合并两次滤液,浓缩至流浸膏(980m1),并将其置于60℃烘箱中恒温烘至于浸膏(1g干浸膏相当于4.9g生药)。
  1.2 试验动物 清洁级ICR种小鼠,体重(20±2)g,雌雄各半,合格证号:滇实动证第2004009号,动物及饲料由云南省昆明医学院实验动物中心提供。
  1.3 试验器材 小鼠灌胃器,常用手术剪刀,镊子,试管,(ALCYON300)全自动生化仪,离心机,恒温水浴。
  1.4 药物与试剂 芒种花醇提液,芒种花水提液,胡黄连醇提液。6.14%花生油CCl4(批号:4870903-6)。AST检测试剂盒(批号字2004第3060165号),ALT检测试剂盒(批号字2004第3060162),LDH检测试剂盒(批号字2004第3060212)。以上试剂盒均由四川省迈克科技有限公司提供。
  1.5 试验方法 取小鼠70只,雌雄各半,将小鼠随机分为正常对照组,造模组,芒种花醇提取物大、小剂量组,芒种花水提取物大、小剂量组,芒种花醇提取物+胡黄连醇提取物组。每组10只小鼠。正常对照组给予基础饲料和灭菌饮用水不用CCL染毒;造模对照组给予基础饲料和灭菌饮用水喂养7天后,一次性给腹腔注射5%CCl4花油10ml/k8染毒;芒种花醇提取物大剂量组(2.55g提取物/kg.d)、小剂量组(0.85g提取物/kg.d),芒种花水提取物大剂量组(2.16g提取物/kg.d)、小剂量组(0.72g提取物/kg.d),芒种花醇提取物(2.55g提取物/kg.d)+胡黄连醇提取物组(0.93g提取物/kg.d),造模前各受试组小鼠口服灌胃每日1次,灌胃体积10ml/ks连续灌胃给药7天,第7天灌胃各受试组动物均以1次性腹腔注射5%CCl4花生油染毒,12h后,将各组小鼠称重后,受试各组再行口服灌胃给药1次。30min后,受试给药组与染毒12h后造模组,正常对照组,同时经股动脉取血,取血清测定各组动物AST、ALT、LDH值。所得数据均用均数±标准差(x±s)表示,用t检验处理数据。
  
  2 结果
  
  2.1 实验结果 见表1。
  结果表明,芒种花醇提物大、小剂量组,水提物大、小剂量组和醇提物加胡黄连醇提物组与造模组相比较,谷丙转氨酶(ALT)指标均有所明显降低(P<0.01),乳酸脱氢酶(LDH)指标,除醇提物大剂量组和水提物小剂量组外,实验给药组与造模组相比较有所降低(P<0.01),门冬氨酸氨基转移酶(AST)指标。与造模组比较,均有降低(P<0.01),差异有显著意义。模型组与空白对照组比较AL了、AST指标有明显增高。表明实验给药组对因CCL所至的肝损伤小鼠模型血清学AS了、ALT、LDH指标均有所降低和改变。
  
  
  3 讨论
  
  CCL为选择性肝脏毒物,主要用于动物肝损伤模型建立。目前认为与CCL自身和其自由基代谢产物有关,可使细胞膜系统发生脂质过氧化反应,破坏细胞膜结构完整性,干扰细胞代谢,引起细胞损伤,小鼠CC乙染毒12h后,出现动物血清中AS丁、ALT、LDH活性增高,CCl4染毒致肝损伤小鼠模型是一种经典造模方法。一次性染毒多用于动物实验性急性肝损伤的研究,本实验用芒种花提取物以预防口服给药对一次性CCl4染毒致肝损伤小鼠的动物模型的影响进行了实验观察。结果表明,实验各组动物血清ALT指标与模型组比较均为降低;实验组除醇提取物大剂量组和水提取物小剂量组外,其它实验组血清LDH指标与模型组比较均有降低;同时实验组血清AS7指标与模型组比较均有降低趋向。模型组与空白对照比较,和AST、ALT值高于空白组,表明CCl4染毒后,小鼠已造成一定的肝损伤。对于LDH指标数据值情况,初步分析。可能与血清量少和溶血有关,但从数值分析看有一定的改变趋向关联性,根据实验结果所示表明,芒种花水提取物、醇提取物、醇提取物+胡黄连醇提取物均对因CCl4致急性肝损伤小鼠模型血清学指标有影响或不同程度降低,提示有一定的保肝作用,其机理有待进一步研究。

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